nanoACQUITY UPLC 시스템 - Instrument

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[측정기&계측기] nanoACQUITY UPLC 시스템

관리자 2021-10-27 14:29:05

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■	재현성 있는 나노 플로(Nano-flow) 분석
	뛰어난 재현성의 나노 스케일 분석
	트립신(trypsin)으로 절단한 사람 세포의 추출물(12시간 이상, 샘플 수=6)을 일반 분석 스케일의 유속으로 분석하면 그 크로마토그램의 머무름 시간(retention time) 재현성(reproducibility)을 확인할 수 있습니다. 하지만 서서히 증가하는 gradient 조건으로 실험한 경우에, 2시간이 지나면 0.3% B/min 정도 변화가 발생합니다. 비교 실험에서의 머무름 시간 (retention time) 변동은 펩타이드 구조의 변화(단백질 expression 과정 중에 일어날 수 있는 변화) 때문입니다.

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재현성 있는 나노 플로(Nano-flow) 분석

뛰어난 재현성의 나노 스케일 분석

트립신(trypsin)으로 절단한 사람 세포의 추출물(12시간 이상, 샘플 수=6)을 일반 분석 스케일의 유속으로 분석하면 그 크로마토그램의 머무름 시간(retention time) 재현성(reproducibility)을 확인할 수 있습니다. 하지만 서서히 증가하는 gradient 조건으로 실험한 경우에, 2시간이 지나면 0.3% B/min 정도 변화가 발생합니다. 비교 실험에서의 머무름 시간 (retention time) 변동은 펩타이드 구조의 변화(단백질 expression 과정 중에 일어날 수 있는 변화) 때문입니다.

■	높은 피크용량(Peak Capacity)에서의 분리
	절단된 형태의 단백질 표준물질 (펩타이드)의 분리 실험에서 3μm 입자로 충진된 컬럼을 사용했을 때(위)와 1.7μm 입자의 컬럼을 사용했을 때(아래) 차이를 확인할 수 있습니다. 1.7μm 입자의 컬럼을 사용했을 때 훨씬 높은 감도와 분리능이 뛰어난 그리고 잘 농축된 크로마토그램을 얻을 수 있고 더 많은 MS 정보를 얻을 수 있습니다.

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높은 피크용량(Peak Capacity)에서의 분리

절단된 형태의 단백질 표준물질 (펩타이드)의 분리 실험에서 3μm 입자로 충진된 컬럼을 사용했을 때(위)와 1.7μm 입자의 컬럼을 사용했을 때(아래) 차이를 확인할 수 있습니다. 1.7μm 입자의 컬럼을 사용했을 때 훨씬 높은 감도와 분리능이 뛰어난 그리고 잘 농축된 크로마토그램을 얻을 수 있고 더 많은 MS 정보를 얻을 수 있습니다.

■	일체형 샘플 트래핑(Trapping)
	Heating and Trapping 모듈 개략도 + 직접 방식과 트래핑 방식의 크로마토그램 직접 로딩(direct loading) 및 트래핑(trapping)

	직접 로딩(direct loading) 및 트래핑(trapping)- 200fmol의 yeast enolase 단백질을 트립신(trypsin)으로 절단하여 만든 펩타이드를 사용한 분리 실험에서 (a) 분석 컬럼에 직접 로딩(direct loading)하고 트래핑(trapping)하는 방법 그리고 (b) 분석 컬럼에서 한번 분리한 후 트래핑(trapping)하는 방법을 비교해 보면, 두 방법 모두 펩타이드 성분을 효과적으로 분리하는 능력을 보여줍니다. 크로마토그램에서의 실제 확인 실험에서도 동일한 분리능을 나타냅니다.

■	나노 스케일에서의 UPLC 테크놀로지
	Binary Solvent Manager
	nanoACQUITY UPLC System’s Binary Solvent Manager (BSM) – 빠르게 반응하는 유속 센서 (flow sensor), 최적화된 튜빙(tubing) 그리고 섬세한 알고리즘은 최저200 nL/min의 속도를 유지해 줍니다. 자동화된 배출 밸브(vent valve) 가 있어 프라임(priming), 퍼지(purging)를 신속하게 되도록 해주며, 용매 선택 밸브 (solvent select valves)가 있어 각각의 펌프에서 밀어주는 용매의 교체를 막아줍니다. 25µm 내경을 가진 두 개의 고속 유로(stream)는 T 모양의 유로로 합쳐집니다. T 내부에 있는 gradient 혼합 부분에서 트래핑 컬럼(trapping column)까지의 시스템 부피(system volume)는 1 µL이하입니다.

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나노 스케일에서의 UPLC 테크놀로지

Binary Solvent Manager

nanoACQUITY UPLC System’s Binary Solvent Manager (BSM) – 빠르게 반응하는 유속 센서 (flow sensor), 최적화된 튜빙(tubing) 그리고 섬세한 알고리즘은 최저200 nL/min의 속도를 유지해 줍니다. 자동화된 배출 밸브(vent valve) 가 있어 프라임(priming), 퍼지(purging)를 신속하게 되도록 해주며, 용매 선택 밸브 (solvent select valves)가 있어 각각의 펌프에서 밀어주는 용매의 교체를 막아줍니다. 25µm 내경을 가진 두 개의 고속 유로(stream)는 T 모양의 유로로 합쳐집니다. T 내부에 있는 gradient 혼합 부분에서 트래핑 컬럼(trapping column)까지의 시스템 부피(system volume)는 1 µL이하입니다.